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东盛上新丨DSRed无毒核酸凝胶染料

人阅读 发布时间:2019-07-17 14:02




 

产品简介

DSRed是一种灵敏、稳定、安全的核酸染色剂,适用于对琼脂糖凝胶和PAGE凝胶中的核酸(dsDNA、ssDNA、RNA)进行染色。DSRed具有高于EB(溴化乙锭)的灵敏性,可以检测到微量的DNA。DSRed通过静电吸引的方式结合核酸分子,在工作浓度下不具有致突变能力,比EB更安全,更环保。

 

使用方法

由于核酸分子结合染料后会影响自身在电泳过程中的迁移,同时会导致相邻核酸条带之间互相影响,因此更推荐使用后染法(泡染法)。对于PAGE凝胶,也推荐使用后染法(泡染法)。

1. 凝胶预染法

1.1 按常规方法配制琼脂糖凝胶;

1.2 向融化的琼脂糖中加入适量的DSRed使其终浓度为1×,充分混匀。如50 ml琼脂糖凝胶中加入5 μl 10,000× DSRed;

1.3 向制胶板中倾倒凝胶,使其凝固;

1.4 加样,按照常规方法进行电泳;

1.5 通过凝胶成像系统(302 nm)观察被染色的凝胶,拍照保存。

2. 后染法(泡染法)

2.1 按常规方法进行电泳;

2.2 用纯水将10,000× DSRed原液稀释3,300倍至约3×。如50 ml纯水中加入15 μl 10,000× DSRed;

备注:也可用0.1 M NaCl 稀释10,000× DSRed至3×,可以增加染料灵敏性,但是重复使用易产生沉淀。

2.3 将电泳后的凝胶置于合适的容器中,如聚丙烯材质的容器,再加入适量的3×染色液浸没凝胶;

2.4 室温轻轻振荡染色约30分钟;

备注:染色时间与凝胶厚度及琼脂糖浓度有关。对于3.5%-10%的PAGE凝胶,通常需染色30分钟至1小时。

2.5 用清水将染色的凝胶缓慢冲洗干净;

2.6 通过凝胶成像系统(302 nm)观察被染色的凝胶,拍照保存;

备注:染色液可以重复使用至少2-3次,置于室温避光保存。

 

注意事项

1. DSRed是大分子核酸染料,难以穿透细胞膜,因而比小分子的溴化乙锭(EtBr,EB)更加安全,但是对DNA迁移的影响也更大。因此,为了避免DNA片段,尤其是多片段的DNA Marker产生条带扭曲或分离异常等现象,我们更推荐建使用后染法来进行染色。

2. DSRed在低温环境下易发生沉淀,因此请置于室温保存。若发生沉淀,可将染料加热至45-50℃,2分钟,振荡溶解。

3.  由于DSRed具有较高的灵敏性,因此建议核酸样品的上样量为50-200 ng/泳道。若未知浓度的样品亮度过高,请降低上样量。

 

为了适应预染法用户的使用习惯,我们专门开发了适用于大分子核酸染料的DNA分子量标准LD DNA Marker系列。因此,当用户使用DSRed等新型无毒核酸染料预染琼脂糖凝胶时,请搭配东盛生物LD DNA Marker系列。





 

如图所示,东盛生物经典版DNA Marker在DSRed预染的凝胶中条带相互挤压,不能有效分离,而LD DNA Marker条带可以正常分离。

 

相关产品

名称

货号

规格

适用核酸染料

LD DSTM2000

LM1101/LM1102

60次/300次

DSRed

LD DSTM5000

LM1111/LM1112

60次/300次

DSRed

DSTM2000

M1101/M1102

60次/300次

EB/Goldview

DSTM5000

M1111/M1112

60次/300次

EB/Goldview

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