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如何利用 PCR 技术诊断猴痘病毒?
人阅读 发布时间:2022-09-08 14:47
猴痘(Monkeypox)是一种相对罕见的疾病,于 1958 年首次在非洲的猴子身上发现,是一种病毒性人畜共患疾病,主要发生在中非和西非的热带雨林地区。猴痘病毒属于痘病毒科正痘病毒属,是一种有包膜的双链 DNA 病毒(≈197 kb),形态为卵形或者砖形,大小为 200×250 nm。

猴痘是一种由受感染动物 (最常见的是啮齿动物) 传播给人类的病毒引起的新发传染病。也可以通过人与人进行二次传播。人主要通过接触感染动物的呼吸道分泌物、病变渗出物、血液、其它体液,或被感染动物咬伤、抓伤而感染。人与人之间主要通过密切接触传播,也可在长时间近距离接触时通过飞沫传播,接触病毒污染的物品也有可能感染。人群普遍易感。既往接种过天花疫苗者对猴痘病毒存在一定程度的交叉保护力。
猴痘病毒和天花病毒相近,在上世纪 80 年代,天花病毒已被消灭,但猴痘病毒一直在中西非存在,直至目前在世界范围内扩散。

(来自 WHO 官网)
据世界卫生组织(WHO)宣布,2022 年 5 月 13 日至 2022 年 6 月 8 日,猴痘已蔓延至美洲、地中海东部、欧洲、西太平洋区域,这四个区域的 28 个国家向世界卫生组织报告了 1285 例确诊病例和 1 例疑似病例。截止目前为止,这四个区域暂无相关的死亡报告。
报告病例中 87% 的病例来自于欧洲地区(1112 例),以及美洲地区(153 例),地中海东部(14 例),西太平洋区域(6 例)。这四个区域之前属于猴痘不常见或从未发生过猴痘相关报道地区。
近日消息,亚洲已出现猴痘病例,新加坡出现一例境外输入病例,韩国出现 2 例境外输入疑似病例,台湾也出现一例境外输入病例。
6 月 10 日,国家卫健委发布了《猴痘诊疗指南(2022 年版)》,文中指出猴痘病毒的实验室检查方法,包括一般检查和病原学检查两种方法。
(一)一般检查
外周血白细胞正常或升高,血小板正常或减少。部分患者可出现转氨酶水平升高、血尿素氮水平降低、低蛋白血症等。
(二)病原学检查
1. 核酸检测:采用核酸扩增检测方法在皮疹、疱液、痂皮、口咽或鼻咽分泌物等标本中可检测出猴痘病毒核酸。
2. 病毒培养:采集上述标本进行病毒培养可分离到猴痘病毒。病毒培养应当在三级及以上生物安全实验室开展。
目前,国内多家 IVD 企业研发的猴痘病毒核酸检测试剂盒都已获欧盟 CE 认证,东盛生物作为优质的 IVD 原料生产企业,可提供多款原料产品,助力 IVD 企业开发猴痘诊断产品:
核酸提取纯化试剂:

核酸扩增原料:

1. Multiplex Probe qPCR Mix(主推)/Multiplex Probe qPCR Mix Plus U 具有很好的多重扩增性能。

Multiplex Probe qPCR Mix 扩增人基因组 DNA
2. Direct Multiplex Probe qPCR Mix Plus U 探针法多重直扩 qPCR 预混液,适用于血液、拭子、组织匀浆等粗样本直接进行扩增,简化检测流程,是目前分子诊断领域的热门技术之一。

拭子样本直扩

发囊样本直扩
东盛品牌 Direct Multiplex Probe qPCR Mix Plus U 与 T 品牌的 qPCR 试剂扩增检测,结果证明东盛品牌 Direct Multiplex Probe qPCR Mix Plus U 在 FAM/VIC/CY5 通道中,灵敏度、多重扩增性与 T 品牌相比表现更好。